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仪器校正---721分光光度计的校正方法

发布时间:2017-12-04 阅读:81

    波长读数校正的方法很多,例如:可用波长精度很高的干涉滤光片;已知吸收峰(λ最大)波长的有色物质的溶液等做标准来校正。前一种方法需要特殊的设备,其精确度较高;后一种方法简易可行,精确度较差,但是,仪器校正时对于721型分光光度计来说,这种方法已能够满足要求。
    配制一已知λ最大的物质的适当浓度的溶液,用待校正的仪器在该物质的λ最大±20nm范围内,用不同的波长测定其A值。可从小于该有色溶液的λ最大约20nm处开始,每隔2nm测定一次,至波长大于该溶液λ最大的约20nm为止。例如用高锰酸钾溶液来校正,其λ最大为525nm。
    故在505至545nm之间,每隔2nm测定一次吸光度。将测定结果作吸收曲线,所得曲线有一吸收峰(若未所得曲线未呈现吸收峰,则表示此仪器波长读数偏差大于20nm,应扩大测定的波长范围),设此吸收峰的波长为λ′最大,将它与已知的λ最大比较,其差即为波长校正值,以λ校表示∶λ校=λ最大-λ′最大。
    若波长校正值λ校很大,则需要重新调整励光灯泡,或检修单色器的光学系统。若波长校正值小于10nm,则可在使用该仪器时,用校正值来校正波长。当λ校为正值时,表示该仪器的波长读数较真实的波长偏高。
    因此在使用该仪器时,若测定某一溶液时所需选定的波长为λ测,那么应调至的波长读数(λ读)则为∶

λ读=λ测-λ校,例如用高锰酸钾溶液(其λ最大为525nm)校正一仪器,测得其吸收峰λ′最大为530nm,则∶λ校=λ最大-λ′最大=525nm-530nm=-5nm用该仪器测定邻菲罗啉铁时,应选用的波长为510nm,其波长读数标尺应旋至λ读:λ读=λ测-λ校=510nm-(-5nm)=515nm即波长读数应调至515nm,而此时真实的波长为510nm。

    注:仪器校正中,若校正不当,不但会影响仪器的测量结果,严重者还会损坏仪器,所以必须严格按照步骤校正。


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